關(guān)于印發(fā)新冠病毒核酸10合1混采檢測技術(shù)規(guī)范的通知
聯(lián)防聯(lián)控機制醫(yī)療發(fā)〔2020〕352?號
各省、自治區(qū)、直轄市及新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團應(yīng)對新冠肺炎疫情聯(lián)防聯(lián)控機制（領(lǐng)導(dǎo)小組、指揮部）：為指導(dǎo)各地做好新冠病毒混采檢測工作，進一步提升新冠病毒核酸檢測能力和效率，落實“四早”要求，有效滿足疫情常態(tài)化防控需求，我們組織制定了《新冠病毒核酸10合1混采檢測技術(shù)規(guī)范》?，F(xiàn)印發(fā)給你們，供參考使用。
國務(wù)院應(yīng)對新型冠狀病毒肺炎疫情
聯(lián)防聯(lián)控機制醫(yī)療救治組
（代章）
2020年8月17日
新冠病毒核酸10合1混采檢測技術(shù)規(guī)范
為落實國務(wù)院應(yīng)對新冠病毒感染肺炎疫情聯(lián)防聯(lián)控機制《關(guān)于做好新冠肺炎疫情常態(tài)化防控工作的指導(dǎo)意見》（國發(fā)明電〔2020〕14號）以及《關(guān)于加快推進新冠病毒核酸檢測的實施意見》（聯(lián)防聯(lián)控機制綜發(fā)﹝2020﹞181號）有關(guān)要求，指導(dǎo)各地新冠病毒混采檢測工作，進一步提升核酸檢測能力和效率，針對新冠病毒核酸10合1混采檢測（10-in-1 test）技術(shù)（指將采集自10人的10支拭子集合于1個采集管中進行核酸檢測的方法），制定本規(guī)范。
一、樣本采集耗材規(guī)格
（一）病毒采集管。
管帽和管體應(yīng)當(dāng)為聚丙烯材質(zhì)，螺旋口可密封，松緊適度。管體透明，可視度好。試管外徑（14.8±0.2）mm×（100.5±0.4）mm, 管帽外徑（15.8±0.15）mm,高度（12.5±0.5）mm。容量企業(yè)定標(biāo)10 ml，內(nèi)含6ml胍鹽或其他有效病毒滅活劑的保存液。保存液應(yīng)當(dāng)帶有易于觀察、辨識的顏色（如粉紅色），并保持一定的流動性，方便取樣。
（二）采集拭子。
宜選用聚酯、尼龍等非棉質(zhì)、非藻酸鈣材質(zhì)的拭子，且柄部為非木質(zhì)材料。折斷點位于距拭子頭頂端3cm左右，易于折斷。
二、采集地點要求
選擇空曠、通風(fēng)良好的場地作為大規(guī)模人群篩查集中采集地點。根據(jù)原有場地條件，劃分為等候區(qū)、采集區(qū)、緩沖區(qū)和臨時隔離區(qū)，有效分散待檢人員密度。應(yīng)當(dāng)設(shè)置急救設(shè)備備用。
（一）等候區(qū)。
設(shè)置人行通道，同時設(shè)置一米線保證等候人員的防護安全。根據(jù)天氣條件配備保溫、降溫，遮陽、遮雨等設(shè)施。老年人、兒童、孕婦和其他行動不便者優(yōu)先采集。
（二）采集區(qū)。
根據(jù)氣候條件，配備帳篷、冷/暖風(fēng)扇、適量桌椅，保證醫(yī)護人員在相對舒適環(huán)境下工作。配備采集用消毒用品、拭子、病毒采集管，并應(yīng)當(dāng)為受檢人員準(zhǔn)備紙巾、嘔吐袋和口罩備用。標(biāo)本如無法及時運送至實驗室，需準(zhǔn)備4℃冰箱或低溫保存箱暫存。應(yīng)當(dāng)制定防止病原微生物擴散和感染的應(yīng)急預(yù)案。
（三）緩沖區(qū)。
空間應(yīng)當(dāng)相對密閉，可供采集人員更換個人防護裝備，放置與采樣點規(guī)模相匹配的防護用品、采集用消毒用品、拭子和采集管，戶外消殺設(shè)備。
（四）臨時隔離區(qū)。
用于暫時隔離在采集過程中發(fā)現(xiàn)的疑似患者或高危人群。
三、采集流程
（一）標(biāo)識及信息登記。
1.登記流程。工作人員在采集前分配10個受檢者為一組，采集前收集并登記受檢者相關(guān)信息（包括姓名、性別、身份證號、聯(lián)系電話、采集地點、采集日期和時間），按照組別進行采集管編號。
2.登記要求。推薦使用身份證讀卡器、二維碼條碼等信息化手段關(guān)聯(lián)受檢者信息，提高信息讀取效率和準(zhǔn)確性。如不具備信息化條件，應(yīng)當(dāng)提前登記《新冠病毒核酸10合1混采檢測登記表》（見附件，以下簡稱混采登記表）。紙質(zhì)登記表隨標(biāo)本送檢前應(yīng)當(dāng)備份存檔于采集點所在社區(qū)，便于及時追溯受檢者。
（二）采集方法。
被采集人員頭部微仰，嘴張大，發(fā)“啊”音，露出兩側(cè)咽扁桃體，采集人員將拭子越過被采集人員舌根，在兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來回擦拭至少3次，然后在咽后壁上下擦拭至少3次。操作完畢后，將拭子頭置入管中、拭子折斷點置于管口處，稍用力折斷使拭子頭落入采集管的液體中，棄去折斷后的拭子桿，旋緊管蓋，將采集管置于穩(wěn)定的置物架上。每例采集后采集人員均應(yīng)進行手消毒。
（三）混合拭子。
依照上述采集方法依次采集其余9支拭子，將完成采集的拭子放入同一采集管中，動作輕柔，避免氣溶膠產(chǎn)生。連續(xù)采集10支拭子以后，旋緊管蓋，防止溢灑。如采集管內(nèi)拭子不足10支，應(yīng)做好特殊標(biāo)記并記錄。
四、標(biāo)本送檢
（一）核對信息。
核對采集管標(biāo)簽與混采登記表信息，確保準(zhǔn)確完整，編號一致。
（二）標(biāo)本放置要求。
將核對后的采集管放入透明塑料密封袋（一層容器）中并封嚴(yán)袋口，用75%乙醇噴灑密封袋外部。將密封袋放入二層容器（可選內(nèi)配適量吸濕材料的包裝盒或雙層醫(yī)用垃圾袋），密封后用75%乙醇噴灑消毒。將二層容器放入具有“生物危害”標(biāo)識的專用標(biāo)本轉(zhuǎn)運箱（推薦使用符合《危險品航空安全運輸技術(shù)細則》A類物品運輸UN2814標(biāo)準(zhǔn)的轉(zhuǎn)運箱），二層容器和轉(zhuǎn)運箱之間應(yīng)當(dāng)放置降溫凝膠冰袋。二層容器應(yīng)當(dāng)固定在轉(zhuǎn)運箱中，保持標(biāo)本直立。密封轉(zhuǎn)運箱后，使用75%乙醇噴灑消毒，轉(zhuǎn)運箱表面潔凈無污染。
（三）標(biāo)本轉(zhuǎn)運要求。
標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)運箱應(yīng)當(dāng)由專門標(biāo)本運送人員負(fù)責(zé)運送。標(biāo)本應(yīng)當(dāng)在采集后2—4小時內(nèi)送至實驗室?；觳傻怯洷矸湃氇毩⒚芊獯?，隨轉(zhuǎn)運箱一同轉(zhuǎn)運。不能立即送檢的，應(yīng)當(dāng)配備專門的冰箱或冷藏箱保存，并做好標(biāo)本接收、保存登記。標(biāo)本采集后24小時內(nèi)可置于4℃保存。
五、實驗室接收
（一）標(biāo)本簽收。
運送和接收人員應(yīng)當(dāng)對標(biāo)本進行雙簽收。接收人員檢查混采登記表是否填寫完整，被檢者信息是否可追溯，轉(zhuǎn)運箱、二層容器有無破損。
（二）標(biāo)本打開。
應(yīng)當(dāng)在生物安全二級實驗室核心區(qū)打開轉(zhuǎn)運箱，取出二層容器。在生物安全柜中打開二層容器，用75%乙醇噴灑或擦拭消毒后，取出密封袋，用75%乙醇試劑噴灑或擦拭消毒，并檢查是否密封完好。
（三）標(biāo)本檢查。
核對采集管標(biāo)簽與混采登記表信息是否一致。取出采集管，檢查管壁是否有破損、管口滲漏等，確認(rèn)無破損、滲漏后用75%乙醇噴灑或擦拭消毒。如有破損、滲漏，應(yīng)當(dāng)立即停止操作，用吸水紙覆蓋后使用0.55%含氯消毒劑進行消毒處理，做好不合格登記后銷毀。
（四）標(biāo)本保存。
不能及時檢測的標(biāo)本放入專用冰箱保存。24小時內(nèi)檢測的標(biāo)本可置于4℃保存。24小時內(nèi)無法檢測的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)置于-70℃或以下溫度保存。如無-70℃保存條件，則于-20℃暫存。避免標(biāo)本反復(fù)凍融。設(shè)立專庫或?qū)９癖４鏄?biāo)本，雙人雙鎖管理。
（五）轉(zhuǎn)運容器移出。
使用后的二層容器內(nèi)外壁經(jīng)75%乙醇擦拭消毒后移出生物安全柜，實驗結(jié)束后使用紫外燈照射消毒。
六、標(biāo)本檢測與質(zhì)量控制
（一）標(biāo)本檢測。
實驗室接收標(biāo)本后，應(yīng)當(dāng)立即進行檢測。檢測前進行充分震蕩洗脫，之后進行核酸提取及擴增實驗。推薦選用包含針對新冠病毒開放讀碼框1ab（open reading frame 1ab，ORF1ab）和核殼蛋白（nucleocapsid protein，N）基因區(qū)域的試劑。若使用核酸提取儀，核酸提取試劑應(yīng)與核酸提取儀配套使用。擴增試劑盒應(yīng)當(dāng)選用國家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)帶有注冊文號的試劑盒。建議選擇檢測限低、靈敏度高的檢測試劑盒。
（二）檢測質(zhì)控。
每批檢測至少有1份弱陽性質(zhì)控品（第三方質(zhì)控品，通常為檢出限的3倍左右）、2份陰性質(zhì)控品（試劑盒自帶陰性質(zhì)控品）和1份空白對照品（生理鹽水或焦碳酸二乙酯處理水）?？瞻讓φ掌窇?yīng)當(dāng)開蓋放置在提取儀或操作臺面上過夜，用于環(huán)境污染評估。質(zhì)控品隨機放在臨床標(biāo)本中，參與從提取到擴增的全過程。
（三）質(zhì)控結(jié)果。
弱陽性質(zhì)控品測定為陽性，陰性質(zhì)控品全部測定為陰性，視為在控。反之，則為失控，不可出具檢測報告，應(yīng)立即分析原因，必要時重新檢測標(biāo)本。
七、檢驗結(jié)果處理
新冠病毒核酸定性檢測報告應(yīng)當(dāng)包括檢測結(jié)果（檢出/陽性、未檢出/陰性）、方法學(xué)、檢出限等。
（一）結(jié)果判斷。
依據(jù)所用擴增試劑說明書，判斷檢測結(jié)果為未檢出/陰性或者檢出/陽性。若結(jié)果處于灰區(qū)，建議作為混采陽性結(jié)果進行復(fù)核。
（二）陽性結(jié)果復(fù)核。
1.混采檢測結(jié)果為陽性、灰區(qū)或單個靶標(biāo)陽性，通知相關(guān)部門對該混采管的10個受試者暫時單獨隔離，并重新采集單管拭子進行復(fù)核。
2.復(fù)核單管核酸檢測如均為陰性，則按照陰性結(jié)果回報。暫時隔離人員即解除隔離；如檢測結(jié)果陽性，按程序上報。
八、檢測后樣本處理
檢測后的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡快就地銷毀，做好高壓滅菌質(zhì)量監(jiān)控和消毒、銷毀記錄。
九、技術(shù)人員基本要求
采樣人員和檢測人員要求應(yīng)滿足《醫(yī)療機構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（試行）》要求。
十、生物安全防護
（一）標(biāo)本采集和運送人員。
對于采集低風(fēng)險區(qū)域人群的采集者，采用二級生物安全防護。包括：一次性帽子、醫(yī)用防護口罩（N95）、手套（必要時雙層）、護目鏡/面屏、隔離衣，鞋套（必要時）。標(biāo)本運送人員采用一級生物安全防護，包括：醫(yī)用外科口罩、乳膠手套、工作服，可戴醫(yī)用防護帽。
（二）標(biāo)本接收和檢測人員。
標(biāo)本接收人員應(yīng)當(dāng)為核酸檢測實驗室經(jīng)生物安全防護培訓(xùn)的指定人員，采用二級以上生物安全防護。生物安全防護標(biāo)準(zhǔn)可根據(jù)所從事工作的危險性進行區(qū)分。進行試劑準(zhǔn)備和核酸擴增的工作人員采用二級防護。處理標(biāo)本的人員必須嚴(yán)格遵照三級防護標(biāo)準(zhǔn)，包括：醫(yī)用防護口罩或N95、單或雙層乳膠手套（條件許可，可以不同顏色）、面屏、護目鏡、工作服外防護服、單或雙層醫(yī)用防護帽，手衛(wèi)生。必要時雙層口罩（外醫(yī)用防護口罩，內(nèi)N95）。
附件：新冠病毒核酸10合1混采檢測登記表
新冠病毒核酸10合1混采檢測登記表
采集地點： ?????????????? ????????? 采集日期： ????????????????
送樣人： ???????????????????? ???? ?送樣人聯(lián)系電話：
送檢時間： ????????? ?接收人： ??? ???????接收時間：
注：送檢時間，接收時間格式為XX月XX日XX時，采集時間格式為XX時；檢測結(jié)果如為ORF1ab或N基因單獨陽性，需詳細列出。